全身性基因敲除

根据目的基因序列设计合成sgRNA,与Cas9 mRNA共同注射到小鼠受精卵。Cas9核酸酶、sgRNA共同结合到基因组靶序列后,切割双链DNA,通过非同源末端连接(Non-homologous end joining , NHEJ)修复途径造...

  根据目的基因序列设计合成sgRNA,与Cas9 mRNA共同注射到小鼠受精卵。Cas9核酸酶、sgRNA共同结合到基因组靶序列后,切割双链DNA,通过非同源末端连接(Non-homologous end joining , NHEJ)修复途径造成目的基因片段缺失或移码突变,进而完成基因敲除。

  技术优势

  经优化的CRISPR系统,显著缩短模型构建周期,F0代即可获得目的基因全身功能性敲除的小鼠,从而使得在F0代小鼠上即可进行表型分析,并在F1代获得稳定遗传的基因敲除小鼠;

  打破物种和品系的限制,可实现对不同遗传背景或已有基因修饰小鼠模型基础上的基因编辑。

  实验流程