基因条件性点突变

条件性点突变主要通过染色体位点特异性重组酶系统实现,如Cre-loxP、Flp-FRT、Dre-Rox系统等,其中最常用的是Cre-loxP系统。在待突变目的基因序列两端各插入两种loxP位点,得到Floxed(flan...

  条件性点突变主要通过染色体位点特异性重组酶系统实现,如Cre-loxP、Flp-FRT、Dre-Rox系统等,其中最常用的是Cre-loxP系统。在待突变目的基因序列两端各插入两种loxP位点,得到Floxed(flanked by loxP)小鼠。将Floxed小鼠与组织或细胞特异性表达Cre重组酶的小鼠交配,从而获得目的基因在特异组织或细胞中表达突变蛋白的小鼠,而该基因在其他组织或细胞中正常表达。
 

  技术优势

  避免常规点突变小鼠可能出现的胚胎致死,通过与不同Cre小鼠交配,可使目的基因的突变蛋白表达在实验动物发育的不同阶段或组织;

  若与控制Cre表达的其他诱导系统相结合,如Cre/ERT、Tet/TetO-Cre系统,则可以实现对目的基因点突变在空间与时间两方面调控。

  实验流程