基因敲入

根据基因敲入位点序列设计合成sgRNA,将Cas9、sgRNA及Donor质粒共同转染目的细胞,通过sgRNA引导Cas9核酸酶对基因敲入位点进行切割,引起DNA双链断裂(Double-strand breaks, DSB),通过同源重组...

  根据基因敲入位点序列设计合成sgRNA,将Cas9、sgRNA及Donor质粒共同转染目的细胞,通过sgRNA引导Cas9核酸酶对基因敲入位点进行切割,引起DNA双链断裂(Double-strand breaks, DSB),通过同源重组(Homology directed repair,HDR)的方式将外源基因精确敲入到目的细胞基因组中。

  技术优势

  经过多步优化的CRISPR/Cas9系统,适用于更广泛的哺乳动物细胞,提高了编辑率高,同时大大降低了脱靶效应。

  实验流程

  


  服务标准

  客户提供:外源目的基因cDNA;

  基因组敲入位点信息;

  目的细胞(可选择由派致代购);

  完全培养基1-2 L(派致提供DMEM及1640常规培养基)。

  派致交付:按指定方案构建的细胞系及项目报告。

  交付周期:8-20周,具体时间取决于靶点复杂程度及细胞生长情况。