稳定转染

稳定转染细胞株,即稳转细胞株,该技术已广泛应用于包括基因功能研究、蛋白质工程、重组抗体制备等生命科学的各个领域。稳转细胞株的构建通常是将外源基因克隆至含有某种筛选...

  稳定转染细胞株,即稳转细胞株,该技术已广泛应用于包括基因功能研究、蛋白质工程、重组抗体制备等生命科学的各个领域。稳转细胞株的构建通常是将外源基因克隆至含有某种筛选标记的载体上,将载体转染目的细胞并整合到染色体中,利用载体携带的筛选标记进行筛选,从而得到可稳定表达目的基因的细胞株。技术优势

  整合位点通常为高表达位点,使外源基因高效表达;

  稳定遗传,细胞传代过程中,目的基因不会丢失;

  两种方案可供选择:PiggyBac转座酶方案能高效整合外源目的基因,不受基因片段大小的影响;慢病毒方案介导外源基因整合可以适用于大部分难转染的细胞;

  加入筛选标签,确保外源目的基因在细胞传代过程中能稳定遗传。

  

  实验流程

  

 

  方案选择

  整合效率实验周期优点缺点

  PiggyBac转座酶整合方案高短操作方便,可制备较大片段的外源基因不适用于转染效率低的细胞

  慢病毒感染方案高较长表达效率高,能感染大部分难转染细胞需要包装慢病毒,不适用于大片段基因表达

  服务标准

  客户提供:外源目的基因cDNA;

  目的细胞(可选择由派致代购);

  完全培养基1-2 L(派致提供DMEM及1640常规培养基)。

  派致交付:按方指定案构建的细胞系及项目报告。

  交付周期:6-12周,具体时间取决于方案选择、目的基因大小及细胞生长情况。