内源基因激活

基因过表达是研究基因功能的重要方法,传统过表达方法是通过外源启动子驱动外源目的基因的cDNA表达,该方法并不能很好的模拟基因转录时丰富的转录本,并且受到过表达载体的限制...

  基因过表达是研究基因功能的重要方法,传统过表达方法是通过外源启动子驱动外源目的基因的cDNA表达,该方法并不能很好的模拟基因转录时丰富的转录本,并且受到过表达载体的限制,无法过表达开放阅读框超过20kb的基因。基于CRISPR/dCas9的SAM系统,能够通过dCas9招募转录激活元件HSF、P65和VP64,从而实现高效的内源基因激活,该技术相比传统的cDNA过表达能够更好的还原基因在细胞水平的过表达状态。
 


 

  技术优势

  能够模拟内源基因丰富的转录本,实现多种转录本的共同过表达;

  没有目的基因大小限制,可对任意大小的基因实现过表达;

  可以同时激活多个基因;

  通过慢病毒可实现内源基因的长效激活。

  适用范围

  过表达目的基因较大,外源过表达效率低;

  需要同时过表达目的基因的多个不同转录本;

  需要在同一个细胞内激活/过表达两个及以上的基因(该系统可同时激活2-10个目的基因)。

  实验流程

  

 

  载体信息

  

 

  服务标准

  客户提供:需激活的目的基因ID;

  目的细胞(可选择由派致代购);

  完全培养基1-2 L(派致提供DMEM及1640常规培养基)。

  派致交付:按指定方案构建的细胞系及项目报告。

  交付周期:8-20周,具体时间取决于靶点复杂程度及细胞生长情况。